关于实验室抽虑除菌的操作

问：最近要做一些培养基 ，有一些糖类需要过滤除菌
，但不知道怎么操作，还需要什么辅助设备？

答：你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了 ，一般在超净工作台上进行 。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格
，指的是滤膜的孔径大小吧
。一般0.22就够了！

答：如果溶液的量比较大，超过500ml ，可以采用已灭菌的抽滤瓶，预先垫好0.22um 的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢
，使用时，不用在无菌室中进行 ，只要保证收集瓶无菌状态就可以 。抽滤后
，过滤好的溶液在无菌条件下倒进已灭菌的空试剂瓶中
。

如果用小量的溶液过滤，无菌室内用一次性注射器和一次性0.22um滤膜（millipore或pall都有卖）就可以。

答：看过滤的量 ，如果量小
，用注射器加滤器、0.22微米滤膜过滤，滤器加上滤膜后盖紧 ，稍旋松
，饭盒密封100度蒸馏水煮沸30分钟灭菌，用来承接无菌糖水的瓶需高压 。用时在无菌操作台上操作 ，并先旋紧滤器
，注意滤器外流下去的哪怕一滴也会造成染菌；过滤应该是费力的，如果感觉很轻松 ，则滤膜已破。0.45微米的滤膜一般用于两次过滤的第一次，以防止0.22堵塞
。注射器
，若能高压更好些。

如果量大，正压可用蠕动泵接皮管接不锈钢滤器大张滤膜 ，这些都是要高压的 。负压可用抽滤
。

滤过除菌用微孔滤膜的孔径应为

0.45微孔滤膜能过滤微米除颗粒和大多数细菌微生物
，0.22微孔滤膜可以达到GMP或者药典规定的除菌99.99%的要求。

其他孔径：

3.0-10.0μm：RO脱盐前之保安过滤；

0.6-0.8μm：大剂量注射液 、大输液中的微粒过滤，啤酒
、饮料过滤 ，油类光刻胶、喷漆溶剂等的澄清过滤 。

扩展资料：

注意事项：

1 、 为保护延长滤膜的使用寿命,可用同等大小的滤纸或绢绸布(应先用质量浓度20 g·L - 1磺酸钠溶液煮沸绢绸布约30 min
，然后用注射用水清洗干净)放在滤膜上,防止滤膜破裂
。

2
、微孔滤膜之孔径为锥体状,光滑的一面孔径小为正面;粗糙的一面孔径大为反面，安装时应将正面(光面)朝上 ，反面(暗面)朝下
，否则易被杂质阻塞孔径,影响滤速。温度低时应将处理好的滤膜放于与药液温度相同的注射用水中浸泡5～10 min，可避免因温差使滤膜抗拉强度降低而导致破裂现象 。

3、用作起泡点的测定：测定起泡点压力可以反映微孔滤膜的孔径大小,这与被滤过的药液质量密切相关 ，也是保证微孔滤膜质量的一种重要手段
。

使用的微孔滤膜应事先放在70℃左右的注射用水中浸泡1 h。将水倾出后再用温注射用水浸泡过夜备用 。临用时取出用注射用水淋洗干净
，即可装入过滤器中使用安装
。时防止滤膜装歪泄漏。

4 、若发现微孔滤膜有小洞孔或小裂缝时,可用原不用的破滤膜漂洗干净后烘干，然后撕碎放于少量丙酮的小杯中 ，搅拌成糊状粘液,将此粘液滴于平放滤膜的小洞孔或小裂缝处，不宜过多粘液覆盖而稍大即可
，挥干后则可继续使用而不影响 。

百度百科-微孔滤膜

滤过除菌用微孔滤膜的孔径应为：?0.22~0.3μm。

在细菌过滤器上的滤膜的产品规模中显示，其孔径一般为0.45um ，滤膜直径35mm
，细菌都有一定的大小，若过滤器的滤膜 ，或者滤柱
，（或者其他的），孔径小于细菌的直径 ，那么当液体或者气体通过的时候
，细菌就被挡住，过不去 ，那么过去的液体或者气体
，就是无菌的
。

注意事项：

1、 为保护延长滤膜的使用寿命,可用同等大小的滤纸或绢绸布(应先用质量浓度20 g·L - 1磺酸钠溶液煮沸绢绸布约30 min，然后用注射用水清洗干净)放在滤膜上,防止滤膜破裂。

2
、微孔滤膜之孔径为锥体状,光滑的一面孔径小为正面;粗糙的一面孔径大为反面 ，安装时应将正面(光面)朝上，反面(暗面)朝下
，否则易被杂质阻塞孔径,影响滤速 。温度低时应将处理好的滤膜放于与药液温度相同的注射用水中浸泡5～10 min，可避免因温差使滤膜抗拉强度降低而导致破裂现象
。

3、用作起泡点的测定：测定起泡点压力可以反映微孔滤膜的孔径大小,这与被滤过的药液质量密切相关 ，也是保证微孔滤膜质量的一种重要手段。

使用的微孔滤膜应事先放在70℃左右的注射用水中浸泡1 h 。将水倾出后再用温注射用水浸泡过夜备用
。临用时取出用注射用水淋洗干净
，即可装入过滤器中使用安装。时防止滤膜装歪泄漏 。

4 、若发现微孔滤膜有小洞孔或小裂缝时,可用原不用的破滤膜漂洗干净后烘干，然后撕碎放于少量丙酮的小杯中 ，搅拌成糊状粘液,将此粘液滴于平放滤膜的小洞孔或小裂缝处
，不宜过多粘液覆盖而稍大即可，挥干后则可继续使用而不影响
。

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